分子生物学
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发布日期:2025-09-23

分子生物学技术服务内容
一、ELISA(酶联免疫吸附实验)
原理:利用抗原-抗体反应结合酶催化显色,实现蛋白定量。
分类:
夹心ELISA:双抗体夹心法检测抗原(如细胞因子IL-6)。
竞争ELISA:适用于小分子检测(如药物代谢物)。
优势:高通量(96孔板)、灵敏度达pg/mL级。
二、Western Blot(WB)
原理:基于SDS-PAGE电泳分离蛋白,通过抗体特异性识别目标蛋白。
应用:
蛋白表达水平半定量分析
翻译后修饰(如磷酸化)检测
局限性:操作复杂,需优化转膜效率及抗体特异性。
三、PCR(聚合酶链式反应)
原理:通过变性-退火-延伸循环扩增目标DNA片段,灵敏度可达单拷贝水平。
应用:
病原体检测(如HIV病毒载量分析)
基因突变筛查(如BRCA1/2突变检测)
优势:快速、高特异性,但需注意引物设计以避免非特异性扩增。
四、基因组学(Genomics)
1研究内容
(1)基因结构与功能
解析生物体全部基因序列(如人类基因组计划)及非编码区功能
研究基因变异(SNPs、CNVs)与疾病关联(如癌症驱动基因突变)
(2)进化与比较基因组学
通过泛基因组分析物种多样性2
2.技术方法
二代测序(NGS)、三代测序(PacBio)
单细胞基因组学(如肿瘤异质性研究)
五、蛋白组学(Proteomics)
1.研究内容
(1)蛋白质表达与修饰
定量分析组织/细胞中蛋白质丰度(如肿瘤标志物筛选)
研究翻译后修饰(磷酸化、糖基化)对功能的影响
(2)蛋白质互作网络
构建信号通路模型(如MAPK通路调控机制)
2.技术方法
质谱技术(LC-MS/MS)
抗体芯片(如多重蛋白检测)
六、代谢组学(Metabolomics)
1研究内容
(1)代谢物动态监测
检测小分子代谢物(<1000 Da)变化(如氨基酸、脂类)
揭示代谢通路异常(如糖尿病糖代谢紊乱)
(2)疾病生物标志物
通过代谢指纹识别早期疾病(如阿尔茨海默症脑脊液标志物)
2.技术突破
单细胞代谢组学(HT SpaceM技术实现高通量检测)

