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分子生物学

发布日期:2025-09-23

仪器

分子生物学技术服务内容

一、ELISA(酶联免疫吸附实验)‌

‌原理‌:利用抗原-抗体反应结合酶催化显色,实现蛋白定量‌。

‌分类‌:

‌夹心ELISA‌:双抗体夹心法检测抗原(如细胞因子IL-6)。

‌竞争ELISA‌:适用于小分子检测(如药物代谢物)‌。

‌优势‌:高通量(96孔板)、灵敏度达pg/mL级‌。

二、Western Blot(WB)‌

‌原理‌:基于SDS-PAGE电泳分离蛋白,通过抗体特异性识别目标蛋白‌。

‌应用‌:

蛋白表达水平半定量分析

翻译后修饰(如磷酸化)检测

‌局限性‌:操作复杂,需优化转膜效率及抗体特异性‌。‌

三、PCR(聚合酶链式反应)

‌原理‌:通过变性-退火-延伸循环扩增目标DNA片段,灵敏度可达单拷贝水平‌。

‌应用‌:

病原体检测(如HIV病毒载量分析)

基因突变筛查(如BRCA1/2突变检测)

‌优势‌:快速、高特异性,但需注意引物设计以避免非特异性扩增‌。

四、基因组学(Genomics)

‌1研究内容‌

‌(1)基因结构与功能‌

解析生物体全部基因序列(如人类基因组计划)及非编码区功能‌

研究基因变异(SNPs、CNVs)与疾病关联(如癌症驱动基因突变)‌

‌(2)进化与比较基因组学‌

通过泛基因组分析物种多样性2

‌2.技术方法‌

二代测序(NGS)、三代测序(PacBio)

单细胞基因组学(如肿瘤异质性研究)‌

五、蛋白组学(Proteomics)

‌1.研究内容‌

‌(1)蛋白质表达与修饰‌

定量分析组织/细胞中蛋白质丰度(如肿瘤标志物筛选)‌

研究翻译后修饰(磷酸化、糖基化)对功能的影响‌

‌(2)蛋白质互作网络‌

构建信号通路模型(如MAPK通路调控机制)

‌2.技术方法‌

质谱技术(LC-MS/MS)

抗体芯片(如多重蛋白检测)

六、代谢组学(Metabolomics)

‌1研究内容‌

‌(1)代谢物动态监测‌

检测小分子代谢物(<1000 Da)变化(如氨基酸、脂类)‌

揭示代谢通路异常(如糖尿病糖代谢紊乱)‌

‌(2)疾病生物标志物‌

通过代谢指纹识别早期疾病(如阿尔茨海默症脑脊液标志物)‌

‌2.技术突破‌

单细胞代谢组学(HT SpaceM技术实现高通量检测)‌


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